【关键词】 甘草； 脂质体； 大鼠； 脂肪肝； 肝硬化 Therapeutic effects of compound glycyrrhizin liposome on fibrosis of the rats with nonalcoholic steatohepatitis YE Hong-jun, WEI Shi-liang, WANG Hui-chao, LIU Xiao-yi, WAN Hui-jun, YI Xue-rui, YUAN You-cheng, KONG Xiang-ping. 【Key words】Glycyrrhizia uralensis; Liposomes; Rats; Fatty liver; Liver cirrhosis 【First author’s address】Department of Gastroenterology, Shenzhen Hospital, Peking University, Shenzhen Guangdong 518036, China Email: shenzhong007@ 163.com 近年来，非酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的发病率增高，由其引起的肝纤维化和肝硬化发病率也有上升趋势。但因其发病机制复杂，迄今为止未找到有效的治疗药物[1-2]。甘草甜素有抗炎、免疫调节、保肝作用，被用于治疗各种急慢性肝损伤[3]。但因有类激素样不良反应，使其应用受到一定限制。本研究对高脂饮食诱发的NASH大鼠给予复方甘草甜素脂质体治疗，另以复方甘草甜素和丹参作为对照药物，观察前者对大鼠NASH和肝纤维化的疗效。 一、材料与方法 1. 材料：清洁级SD雄性大鼠45只，体质量（80±120）g，购自广州中山大学动物实验中心。胆固醇购自上海化学试剂公司；复方甘草甜素脂质体（复方甘草甜素2mg/ml）采用薄膜分散与超声法制备；复方甘草甜素注射液购自日本米诺发源制药株式会社（20ml含有甘草酸苷40mg、甘氨酸400mg、盐酸半胱氨酸20mg）；丹参注射液购自杭州正大青春宝药业有限公司（每毫升含生药 2. 方法：SD大鼠适应性喂养1周，随机分为造模组40只，以（基础饲料 3. 疗效检测：所有动物在实验16周后称体质量；以2.0ml/kg水合氯醛腹腔注射麻醉，股动脉采血，血清ALT、AST、GGT等采用全自动生物化学分析仪（购自日本Olympus公司）测定。取肝脏并称质量；取肝组织做HE染色，肝组织病理学检查由专业病理医师完成，脂肪肝分度、炎症和纤维化分级的量化计分参照文献[4]。 4.统计学分析：数据用均数±标准差（x-±s）表示，以SPSS10.0统计软件分析。多组间比较采用单因素方差分析，方差齐时，采用LSD检验；方差不齐时，采用Tamhane’s T2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。 二、结果 1.肝功能的变化：模型组和复方甘草甜素对照组血清ALT、AST、GGT活性差异无统计学意义，但均较正常组显著升高；治疗组和丹参对照组的ALT、AST、GGT活性差异也无统计学意义，但其血清AST、GGT水平较模型组和复方甘草甜素对照组显著降低（P值均<0.01），两ALT水平无明显差异（表1，略）。 复方甘草甜素对照组比较，P<0.01 2. 肝组织病理学改变：模型组肝细胞中度脂肪变，肝组织呈点片状坏死，以汇管区为中心粗纤维条索状增生并向小叶内伸延（图 除正常组外，各组的脂肪肝分度都比较相似；模型组与两种对照组的炎症分级接近，而治疗组明显改善；用药后，肝组织的纤维化程度都有不同程度的改善，治疗组的效果更为明显。两种对照药物对肝组织学的改善效果相似。见表2。 三、讨论 脂质体（1iposome）作为药物载体应用始于20世纪70年代。将药物粉末或溶液包埋在直径为纳米级的微粒中，进入人体后被网状内皮系统吞噬，药物主要在肝、脾、肺和骨髓等组织器官中积蓄，可提高药物治疗指数、减少药物治疗剂量和降低药物的毒性[5]。 本研究观察药物脂质体的靶向作用与治疗脂肪肝性肝炎和肝纤维化的作用。结果显示，高脂饮食使大鼠出现血清ALT、AST、GGT活性显著升高，导致肝组织弥漫性脂肪变、肝组织炎症和纤维化等NASH和肝纤维化改变。16周后复方甘草甜素脂质体治疗组和丹参对照组血清AST、GGT水平低于模型组，治疗组的GGT水平低于复方甘草甜素对照组。治疗组肝组织炎症积分明显低于模型组和两个对照治疗组；治疗组和两个对照治疗组的肝纤维化计分均低于模型组，以治疗组降低更为明显，提示复方甘草甜素脂质体较丹参或复方甘草甜素能更有效地减轻NASH的炎症病变和肝纤维化程度。其机制可能是脂质体作为药物的一种载体形式，靶向治疗增强了复方甘草甜素的护肝作用，使药物集中分布在肝脏内，增强药效。另一方面，脂质体内含的磷脂，是细胞膜的成分之一，为损伤肝细胞膜的再生提供原材料，发挥有效的护肝和防治肝纤维化作用，可为NASH的防治提供一种药物新剂型。 参 考 文 献 [1]Siebler J, Galle P. Treatment of nonalcoholic fatty liver disease. World J Gastroenterol, 2006, 12: 2161-2167. [2]Fan JG.Non-alcoholic fatty liver disease:it’s past,present and future.Zhonghua Ganzangbing Zazhi, 2007, 15: 641-643. (in Chinese) 范建高.非酒精性脂肪性肝病的过去、现在和将来.中华肝脏病杂志,2007,15:641-643. [3]Ma ZC. The mechanism and effect of Glycyrrhizin on CCl4-induced liver damages.Dulixue Zazhi, 2005, 19: 250251. (in Chinese) 马中春.甘草甜素对四氯化碳诱发大鼠肝脏损伤的作用及其机制. 毒理学杂志,2005,19:250-251. [4]Fatty Liver and Alcoholic Liver Disease Study Group of the Chinese Liver Disease Association. Guidelines for diagnosis and treatment of nonalcoholic fatty liver diseases. Zhonghua Ganzangbing Zazhi, 2006, 14: 161-163. (in Chinese) 中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组.非酒精性脂肪性肝病诊疗指南.中华肝脏病杂志,2006,14:161-163. [5]Ma JG. Research progress of 1iposomes.Zhonghua Xiandai Yixue Yu Linchuang, 2005, 3: 4143. (in Chinese) 马金刚.脂质体研究进展.中华现代医学与临床,2005,3:41-43. 中华肝脏病杂志版权 |