脂肪肝是一种由多种疾病和病因引起的以肝内脂肪变性为主的病理学状态，近年来随着饮食结构和生活方式的改变，由高脂饮食和饮酒所致混合性脂肪肝及脂肪性肝炎呈不断上升趋势。脂肪肝的治疗目前尚无特效药物，中药在治疗脂肪肝方面有其特殊地位。本研究观察肝脂合剂对大鼠混合性脂肪肝的治疗作用，初步分析其作用机制。 材料与方法 一、材料 健康成年雄性Wistar大鼠(清洁级)32只，体重(200±5)g，购自吉林大学实验动物中心。复方中药制剂肝脂合剂由银杏叶、泽泻、柴胡、女贞子等中药组成，经水煎醇提法制成每毫升含1 g生药的口服液，由吉林大学第一医院制剂室制备。胆固醇猪胆盐购自上海新兴化工厂，丙氨酸氨基转移酶(ALT)、酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)和丙二醛(MDA)试剂盒购自南京建成生物公司。 二、方法 (一) 大鼠脂肪肝模型的建立及给药方法取Wistar雄性大鼠随机分为3组：正常对照组正常饮食喂养，模型组给予76.5%基础饲料、2%胆固醇、1.5%胆盐、20%猪油，自由饮水，同时灌服白酒每16 ml/kg。肝脂合剂合药组为在模型组基础上同时给予肝脂合剂每日1 ml灌胃。实验动物自由饮水和进食，饲养于(20±2)℃，明暗各12 h的动物实验室内，于实验后4周处死全部动物，方法为隔夜禁食，次日以2%戊巴比妥钠溶液1 ml/kg体重腹腔内注射麻醉，从下腔静脉采血后处死，迅速取出肝脏，按常规制备血清和肝组织病理学检查。 (二) 生化指标测定按试剂盒说明书操作，分别测定血清TC、TG、转氨酶、肝组织GSHPx和MDA。 (三) 病理学检查取肝脏左叶，10%甲醛固定，苏丹Ⅲ染色，观察肝脏组织的脂肪变程度。 三、统计学方法 组间比较采用两样本均数的t检验，肝脏组织的脂肪变程度采用秩和检验。结果 一、肝组织病理学变化 光镜下苏丹Ⅲ染色显示对照组肝组织形态学表现正常，模型组所有动物肝细胞均出现了中至重度脂肪变性，未见炎细胞浸润，肝脂合剂组肝组织形态接近对照组，有极少数肝细胞内有小泡性脂滴。两组间比较P<0.05，有显著性差异。 表1（略） 二、血清TC、TG、转氨酶、肝组织GSHPx和MDA变化 模型组与对照组比较，血清TC、TG、转氨酶和肝组织MDA明显升高，肝组织GSHPx明显降低，两组间比较P<0.05，有显著性差异。肝脂合剂组血清TC、TG、转氨酶、肝组织GSHPx和MDA恢复至接近对照组水平，两组间比较P>0.05，无显著性差异。 表2（略）表3（略） 讨论 近年来脂质过氧化在脂肪肝发病机制中的作用研究较多。脂质过氧化使自由基生成增多，自由基氧化细胞膜脂质，同时氧化细胞膜蛋白，最终导致细胞结构和功能损害［1］。同时脂质过氧化反应干扰了肝细胞脂质代谢，而脂质沉积的增多又加重了过氧化反应，从而导致脂肪肝的发生［2，3］。 以高脂饲料和酒精诱发大鼠混和性脂肪肝模型，观察肝脂合剂对脂肪肝的治疗作用。肝脂合剂由银杏叶、泽泻、柴胡、女贞子等中药组成，银杏叶、泽泻、女贞子有降血脂作用，女贞子、柴胡有抗脂质过氧化作用［4］，银杏叶提取物EGb能有效清除体内自由基和提高抗氧化能力［5］。本实验结果显示，肝脂合剂能够减轻脂肪在肝脏的沉积，可降低伴随的高血脂，显著降低脂质过氧化反应产物MDA，增加抗氧化剂GSHPx，表明肝脂合剂可通过降低脂质过氧化反应，促使氧化及抗氧化恢复动态平衡，从而降低血脂及细胞内脂肪沉积，使肝细胞的结构和功能恢复正常。 参考文献 1Rouach H, Fataccioli V, Gentil M, et al. Effect of chronic ethanol feeding hipid peroxidattion and protein oxidation in relation to liver pathology. Hepatology,1997,23∶155-355. 2林育纯，林忠宁. 肝脂类水平与脂质过氧化指标的多元相关分析.中国公共卫生学报，1997，16∶84. 3Sadrzadeh SMH, Nnji AA, Price PL. The oral iron chelator, 1, 2dimethy-3-hydroxypyrid-4-one reduces hepaticfree iron, lipid peroxidation and fat accumulation in chronically ethanolfed rats. J Pharmacol Exp Ther,1994,269∶632-636. 4王本祥，主编.现代中药药理学.天津：天津科学技术出版社，1997. 5刘诗权，于皆平，冉宗学.银杏叶提取物对大鼠慢性肝损伤的保护作用.中国药科大学学报，2003，34∶61-64. 上海《肝脏》杂志社版权 |