为探讨不同临床类型慢性肝病患者干扰素α/β受体的表达，本文应用流式细胞技术对65例慢性肝病患者的干扰素α/β受体进行分析，并探讨其意义。 材料与方法 一、研究对象 65例乙型肝炎不同临床分型患者(慢性肝炎25例，肝硬化20例，慢性重型肝炎20例)为2004年4月—2005年8月住院患者, 男53例，女12例，平均(30.3±8.6)岁,诊断符号2000年《病毒性肝炎防治方案》［1］。所有患者均进行血常规、B超、血生化、病毒学指标检测。排除合并其他肝炎病毒感染。选择15名门诊健康体检者作正常对照。 二、实验材料 鼠抗人单克隆IgG IFN-α/βRα（H-11）：sc-7391为美国Santa Cruz公司产品；羊抗小鼠IgG1-IFITC(二抗)、溶血素均为BD公司产品；1%多聚甲醛为中国医药集团上海化学试剂公司产品。 三、实验方法 采集静脉血2 ml置于EDTA-K2抗凝管内，在6 h内进行干扰素α/β受体表达检测。取肝素钠抗凝外周血100 μl 2份，分别加入荧光素标记的羊抗小鼠IgG1-FITC（对照管）和IFN-α/βRα（H-11）（实验管）20 μl;将10×溶血素稀释成1×,加入1×溶血素2 ml，使红细胞溶解；加入PBS 2 ml；实验管加入羊抗小鼠IgG1－FITC 20 μl，室温避光孵育20 min;实验管加入PBS 2 ml；加入1%多聚甲醛1 ml。标本置流式细胞仪（FACSCalibur型 美国Becton Dickinson公司产品）检测。选定单核细胞门，每次每样本细胞数均大于10 000个。 四、统计学方法 应用SAS 9.0统计软件整理、分析数据。计量资料以均数±标准差表示。组内与组间均用秩和检验。统计学显著性检验水准为0.05（双侧）。 结 果 流式细胞仪检测不同临床类型乙型肝炎外周血单核细胞膜干扰素α/β受体表达百分率见表1。（略） 讨 论 Ⅰ型干扰素家族包括IFNα和IFN－β，其共用相同的细胞表面受体，即干扰素α/β受体。干扰素抗病毒作用产生需要两个重要的步骤，首先是IFN与细胞膜上干扰素受体结合,然后是通过细胞内信号转导激活细胞内染色体产生抗病毒蛋白。Ⅰ型干扰素受体（IFNR）是由两个亚单位组成的异源二聚体，即IFNR1和IFNR2。正常情况下，机体的干扰素基因和干扰素受体基因都处于静止状态，自然表达很低。表1(略) 流式细胞仪具有速度快、精密度高、准确性好等特点，目前已普遍应用于免疫学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学和生物化学等临床医学和基础医学研究领域。 本文应用流式细胞技术，定量检测了不同临床类型慢性肝病患者外周血单核细胞膜干扰素受体表达。结果显示，慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞膜干扰素受体表达水平显著高于正常人。这与Yatsuhashi等［2］报道的肝炎病毒可引起机体干扰素α/β受体表达增加结果相似。机体感染病毒后，干扰素受体从静止状态转为激活状态，增加干扰素α/β受体表达，作为机体抵抗病毒感染的一种保护性反应。 慢性乙型肝炎的干扰素受体表达水平明显高于慢性重型肝炎组与肝硬化组，提示干扰素α/β受体表达水平与肝脏病变进展有关。随着肝脏损害加重，干扰素α/β受体表达水平明显下降，至肝硬化时其干扰素α/β受体表达水平至最低，提示检测干扰素α/β受体表达水平可以间接反映肝脏损伤程度。对于干扰素受体表达低下的肝硬化患者，应用干扰素抗病毒治疗效果差。最近汤群等［3］发现，应用干扰素治疗时，慢性乙型肝炎无应答患者治疗前单核细胞干扰素α/β受体表达水平显著低于应答者，这可能是干扰素治疗无应答的重要原因之一。 检测干扰素受体表达水平可作为评价肝脏严重程度的指标之一，而维持机体正常的干扰素受体表达功能，对于慢性乙型肝炎患者清除体内病毒具有非常重要的意义。 参 考 文 献 1传染病与寄生虫病学分会、中华医学会肝病学分会. 病毒性肝炎防治方案.肝脏，2000，5∶257－263. 2Yatsuhashi H,Fujino T,Matsumoto T， et al.Immunohistochemical analysis of hepatic interferon alpha/beta receptor level:relationship between receptor expression and response to interferon thrapy in patients with chronic C.J Hepatol,1999,30:995－1003. 8汤群,杨金龙,何生松，等.HBV感染的慢性肝病患者外周血单核细胞中干扰素α\β受体表达.中华传染病杂志,2004,2:49－51. |